Bee仔科普:如何防止PCR管变形及样品蒸发?
来源:Beebio微信公众号
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作者:Bee仔
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发布时间: 472天前
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干货满满,PCR实验时遇到PCR管变形或样品蒸发等问题?给大家分享一点小经验哦
听说很多实验人员在进行PCR实验的时候都会遇到各种各样的问题,今天Bee仔就挑几个经常遇到问题来跟大家分享一点小经验~都是重点,要做笔记的哦~
在进行PCR实验之前,由于需要确保PCR八联管或单管的管盖盖合紧密,部分实验员可能会使劲按压管盖,此时,如果PCR底座的尺寸与PCR管不太适配,就会出现PCR管难以从底座取出的情况。
这个时候如果取出不当,就很容易会造成管盖松动,后续造成样品被污染或者实验室被污染的情况。
遇到上述情况,只要选择合适的PCR底座就可以完美解决啦!Beebio PCR管专用底座适配市面通用的PCR管,不松不紧刚刚好,使劲按压后也能轻松取出。
在做PCR实验的时候,部分实验员可能会遇到:加热时管盖被顶开造成样品蒸发、PCR管变形、实验后取出PCR管时由于内外压力差被顶开管盖等现象。
①在使用热盖可调的PCR仪的时候,如果出现管盖被顶开的情况,则需要在实验前调整好热盖的高度,以刚好可以压紧PCR管为宜,如果高度太高,就有可能会出现实验过程中管盖被管内气流顶出,进而造成管内液体蒸发影响实验结果。如果高度太低把PCR管压太紧,就有可能导致PCR管在压力和高温下变形。至于具体多少是合适的高度,建议找PCR仪技术人员进行确认哦。
②在做少量PCR管反应的时如出现PCR管变形的情况,在有样品管支撑架的情况下,在加热模块上放上样品管支撑架(如下图)就可以避免热盖压力太大把管子压变形。
样品管支撑架
如果没有样品支撑架,则可以在加热模块的4个角落分别放上1个PCR管(如下图1所示),或者在左右两侧各放置一条PCR八联管(如下图二所示)平衡热盖的压力,以防止热盖压力导致PCR单管变形。
③如实验后取出PCR管时出现管盖被顶开的情况,可在实验后确保PCR仪降到室温后再打开热盖,这样就可以避免PCR 管内外温差太大,内部气流把管盖顶开造成实验室污染。
这里建议将PCR反应最后一步的结束温度设为4度,可以有效避免上述情况哦~
由于经过长时加热加压,管体会变得难以从加热模块上取出,这个时候如果直接按住管盖两端取出,容易出现头尾开盖的情况。(如下图3)
在取管前,左右轻摇管体(如下图4),将管体摇松再取下PCR管。
图4.左右轻摇后取出
也可以选择前后/管中握住管身取管(如下图5、6)。
图5.选择前/后管
以上就是Bee仔此次带来的PCR管操作指南啦,你平时实验中还会遇到什么问题呢?可以在私信告诉Bee仔哦,下次说不定就给你出个指南啦~
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